Enne käitlemiskeskkonnast proovide võtmist, tuleks püüda leida vastused järgnevatele küsimustele
- Mis on proovivõtu eesmärk?
- Millistele mikroorganismidele soovitakse proove võtta?
- Kes võtab proovid ja kas ta on selleks koolitatud?
- Kas proovivõtuvahendid on eesmärgipärased?
- Kuidas proovid võtta?
- Millisest ruumist, piirkonnast, tsoonist proovid võtta?
- Millal proovid võtta (tootmise ajal, enne, pärast tootmist)?
- Kui sageli proove võtta?
- Kui mitu proovi tuleb võtta ühel päeval?
- Millised on proovide pakendamise, märgistamise ja transportimise tingimused?
LABRISes on käitlemiskeskkonna proovide analüüsimisel kasutusel kahte tüüpi meetodeid: kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed.
Kvalitatiivsed analüüsimeetodid on kasutusel inimeste haigestumist põhjustavate mikroorganismide (nt Salmonella spp. Listeria spp., patogeenne Escherichia coli) või tinglikult tõvestavate mikroorganismide (nt stafülokokid, E. coli) olemasolu kindlakstegemiseks ning tulemused esitatakse puudumise (ei leitud) või esinemisena (leitud). Nende mikroorganismide tuvastamiseks peaks proovivõtuala olema võimalikult suur, soovitavalt suurusvahemikus 1000 cm2 kuni 3000 cm2 ning eelistatumaks proovivõtutehnikaks on abrasiivse käsna meetod.
Kvantitatiivsed analüüsimeetodid on enamasti kasutusel hügieeninäitajate (nt Enterobacteriaceae, aeroobsed mikroorganismid, pärm- ja hallitusseened) arvuliseks määramiseks ning tulemused esitatakse kolooniaid moodustavates ühikutes määratud pindala või uuritava objekti kohta. Selline lähenemine on enamlevinud puhastusprotsesside ja desinfektsiooni tõhususe hindamisel.
LABRIS pakub proovide võtmiseks järgmisi proovivõtukomplekte:
|
Komplekt suurtelt pindadelt (> 100 cm2) proovide võtmiseks nn abrasiivse käsna meetodil. Komplekt koosneb sulguriga kilekotis olevast puhverdatud peptoonveega niisutatud käsnast ning paarist ühekordsetest kilekinnastest. |
Salmonella spp. |
|
|
Komplekt väiksematelt pindadelt (<100 cm2) proovide võtmiseks tampoonimeetodil on kasutusel 5 ml peptoonsoolalahust ja tampooni sisaldavad proovivõtutuubid. Kohtades, kus proovi võtmine käsnaga ei ole võimalik. |
Patogeensed mikroorganismid ja tinglikult tõvestavad mikroorganismid (Escherichia coli, |
|
|
Hügieeninäitajatele arvukuse määramiseks tampoonimeetodil on kasutusel 10 ml peptoonsoolalahust ja tampooni sisaldavad proovivõtutuubid. Märg-kuiva proovivõtutehnika kasutamisel soovitame juurde küsida ka kuiva steriilse puitvarrega tampooni. |
Aeroobsed mikroorganismid |
|
Proovivõtukomplekte väljastavad keskuse kõik piirkondlikud osakonnad. Enne proovide võtmist hoida proovivõtuvahendeid eelistatult jahutatuna, päikese eest kaitstult. Pärast proovide võtmist tuleks need esimesel võimalusel toimetada laborisse. Transpordi ajal tuleks proove hoida ja transportida tingimustes, mis tagab mikroorganismide eluvõimelisuse, kuid ei ohi põhjuste nende arvukuse muutumist – temperatuuril 1 °C kuni 8 °C. Parim viis selleks onn kasutada jahutuselementidega termokasti.
Lisainfo: kliendihalduse büroo [email protected]
Proovide võtmine
Tootmise või käitlemise keskkonnast proovide võtmisel lähtutakse standardi EVS EN ISO 18593 – Toiduahela mikrobioloogia. Pinnaproovide võtmise horisontaalmeetodid – nõuetest.
Mikroorganismide arvuliseks määramiseks on üldlevinud praktika nn märja-kuiva tampoonimeetodi kasutamine.
- Proovide võtmise ajal tuleks kanda kindaid, mis takistab proovi saastumist proovivõtja naha mikrobiootaga. Proovivõtja kinnastatud käed tuleb seejärel alkoholis immutatud lapiga korralikult desinfitseerida;
- Proovi võtmiseks kindla suurusega pinnalt kasutatakse šablooni, mis on kas autoklaavis või gammakiirgusega steriliseeritud. Juhul, kui šablooni kasutatakse korduvalt, tuleks enne iga proovivõtukorda see alkoholis niisutatud lapiga puhastada ja desinfitseerida. Siinkohal tuleb olla veendunud, et šabloon oleks enne proovivõttu kuiv (pinnal ei tohi esineda visuaalselt nähtavaid alkoholijääke);
- Proovivõtuks kasutatakse ühte märga ja ühte kuiva tampooni. Märja tampooniga kaetakse proovivõtupind, mis annab mikroobirakkudele võimaluse liikuda pinnalt nn vedelfaasi. Seejärel imatakse mikroobe sisaldav vedelik kuiva tampooniga kokku;
- Steriilne tampoon surutakse kindlalt uuritavale pinnale ning tampooni vart sõrmede ja pöidla vahel ümber oma telje pöörates võetakse pinnalt proov;
- Märga tampooni hõõrutakse pöörlevate liigutustega kogu šablooni sees oleva ala kolmes suunas: horisontaalselt, seejärel vertikaalselt ja lõpuks diagonaalselt;
- Sama tehnikat korratakse ka kuiva tampooniga. Kuiv tampoon peaks koguma kogu märja tampooni poolt pinnale jäänud niiskuse;
- Nii märg kui kuiv tampoon asetatakse seejärel peptoonsoolalahust sisaldavasse tuubi, murdes kuiva tampooni varre vajalikult kõrguselt ära;
- Proovivõtutuub suletakse korralikult ning märgistatakse kuupäeva, proovivõtuala kirjelduse, proovivõtuala suuruse ja vajadusel muu informatsiooniga. Proovivõtupindala kirjutamine on nõutav, kui tulemused tuleb esitada kolooniaid moodustavates ühikutes pindalaühiku kohta (nt cfu/cm²);
- Olgugi, et kasutatav lahjendi ei sisalda mikroobide kasvuks olulisi toitaineid, on soovitav pinnad pärast proovide võtmist uuesti puhastada ja desinfitseerida.
Toidukäitlejad, kes valmistavad valmistoitu, mis võib olla tervisele ohtlik Listeria monocytogenes’e tõttu, võtavad proovivõtukava osana töötlemisaladelt ja seadmetelt proove Listeria monocytogenes’e analüüsideks.
Käitlemise keskkonnast proovide võtmisel lähtutakse standardi EVS EN ISO 18593 – Toiduahela mikrobioloogia. Pinnaproovide võtmise horisontaalmeetodid – nõuetest.
Lisaks reguleerib proovide võtmist Euroopa Liidu referentlabori poolt väljatöötatud juhismaterjal.
Rohkem infot L. monocytogenes´e nõuetest leiab samuti Põllumajandus- ja Toiduameti kodulehelt.
LABRISe osakonnad väljastavad õhuproovide sedimentatsioonimeetodil võtmiseks Petri tasse koos mikroobide kasvuks vajaliku söötmega:
- PCA sööde mikroorganismide üldarvu määramiseks;
- DRBC sööde pärm- ja hallitusseente määramiseks.
Õhuproovideks vajalikke tasse väljastatakse ettetellimise alusel. Tellimused esitada e-posti aadressil: [email protected].
Viimati uuendatud 13.01.2025
